TrueBlack? Plus?是由?Biotium?化學家開發(fā)的下一代脂褐素猝滅劑。TrueBlack? Plus?是水溶性的，因此可以在?PBS?而不是乙醇中進行淬火。它極大地減少了脂褐素的自發(fā)熒光，并且具有最小的遠紅背景。

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艾美捷TrueBlack? Plus脂褐素自體熒光猝滅劑，40 X，DMSO溶液#BTM-23014具有更低遠紅背景的淬滅脂褐素：

唯1可用于水性緩沖液而不是?70% EtOH?的脂褐素猝滅劑；

在緩沖液中淬火可以延長厚樣品的孵育時間而不會收縮，與疏水性污漬兼容；

無有害溶劑；

減少來自其他來源（如紅細胞和細胞外基質(zhì)）的自發(fā)熒光；

在免疫熒光染色之前或之后處理組織。

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未經(jīng)淬火處理的甲醇固定人大腦皮層冷凍切片中的脂褐素自發(fā)熒光顯示為在所有通道中發(fā)出熒光的明亮點狀斑點，合并后的圖像呈粉紅色。蘇丹黑?B?的傳統(tǒng)處理會引入高水平的遠紅背景熒光。用原裝?TrueBlack??處理可消除脂褐素自發(fā)熒光，但仍會引入低水平的紅色/遠紅色熒光。TrueBlack? Plus?可在?PBS?中代替?70%?乙醇使用，并以最低水平的遠紅背景淬滅脂褐素自發(fā)熒光。

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TrueBlack? Plus：獨特的脂褐素猝滅劑

自體熒光是組織切片和一些原代細胞類型中非特異性背景熒光的主要來源。自發(fā)熒光的來源包括醛類固定劑、具有內(nèi)源性熒光的組織成分（包括細胞外基質(zhì)蛋白、紅細胞和巨噬細胞）和脂褐素，它由氧化蛋白質(zhì)和脂質(zhì)的高度自發(fā)熒光顆粒組成，隨著年齡的增長在細胞的溶酶體中積累.?雖然通常在藍色和綠色波長中最亮，但自發(fā)熒光具有廣譜熒光，除非淬滅或掩蔽，否則幾乎不可能檢測到組織中的特定熒光信號。

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據(jù)報道，許多處理方法可以減少自發(fā)熒光，包括用硫酸銨和?Tris?淬滅醛類、用硼氫化鈉漂白以及用藍色或黑色染料淬滅自發(fā)熒光。親脂性染料蘇丹黑?B?能高效地掩蓋脂褐素的自發(fā)熒光，但存在引入紅色熒光背景的缺點。Biotium原創(chuàng)的?TrueBlack??脂褐素自發(fā)熒光淬滅劑（貨號?23007)?是作為蘇丹黑?B?的替代品開發(fā)的。它可以有效地淬滅脂褐素自發(fā)熒光，背景比蘇丹黑?B?低得多，但仍然引入低水平的遠紅背景。此外，與蘇丹黑?B?一樣，使用原始?TrueBlack??淬滅劑處理必須在?70%?乙醇中進行，這與某些染色方案和樣本類型不相容。

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開發(fā)?TrueBlack? Plus?可使脂褐素在水性緩沖液中淬滅，背景甚至比原始?TrueBlack??更低。在?PBS?中淬火可以延長厚樣品的孵育時間而不會收縮，并且與疏水性污漬兼容。

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注意：為獲得合適的效果，Biotium建議使用EverBrite? 封片劑等基于甘油的封片劑封片樣品。